ඔස්ටියෝ ආතරයිටිස් (OA) යනු වයස අවුරුදු 65 ට වැඩි වයස්ගත ජනගහනයට බලපාන දිගු කාලීන නිදන්ගත පරිහානීය අස්ථි සන්ධි රෝග වලින් එකකි […]
1]. සාමාන්‍යයෙන්, OA රෝගීන්ට හානියට පත් කාටිලේජ, දැවිල්ල ඇති සයිනෝවියම් සහ ඛාදනය වූ කොන්ඩ්‍රොසයිට් ඇති බව හඳුනා ගන්නා අතර එමඟින් වේදනාව සහ ශාරීරික පීඩා ඇති වේ [
2]. ආතරයිටිස් වේදනාව ප්‍රධාන වශයෙන් ඇති වන්නේ සන්ධිවල කාටිලේජය දැවිල්ල නිසා පිරිහීම නිසා වන අතර, කාටිලේජයට බරපතල ලෙස හානි වූ විට අස්ථි එකිනෙක ගැටීමෙන් දරාගත නොහැකි වේදනාවක් සහ ශාරීරික දුෂ්කරතා ඇති විය හැක [
3]. වේදනාව, ඉදිමීම සහ සන්ධියේ තද බව වැනි රෝග ලක්ෂණ සහිත ගිනි අවුලුවන මැදිහත්කරුවන්ගේ සහභාගීත්වය හොඳින් ලේඛනගත කර ඇත. OA රෝගීන් තුළ, කාටිලේජ සහ උපකොන්ඩ්‍රල් අස්ථි ඛාදනයට හේතු වන ගිනි අවුලුවන සයිටොකයින් සයිනෝවියල් තරලයේ දක්නට ලැබේ [
4]. OA රෝගීන්ට සාමාන්‍යයෙන් ඇති ප්‍රධාන පැමිණිලි දෙකක් වන්නේ වේදනාව සහ සයිනෝවියල් දැවිල්ලයි. එබැවින් වත්මන් OA ප්‍රතිකාරවල මූලික අරමුණු වන්නේ වේදනාව සහ දැවිල්ල අඩු කිරීමයි. [
5]. ස්ටෙරොයිඩ් නොවන සහ ස්ටෙරොයිඩ් ඖෂධ ඇතුළුව ලබා ගත හැකි OA ප්‍රතිකාර මගින් වේදනාව සහ දැවිල්ල සමනය කිරීමේ ඵලදායී බව ඔප්පු වී ඇතත්, මෙම ඖෂධ දිගු කාලීනව භාවිතා කිරීම හෘද වාහිනී, ආමාශ ආන්ත්‍රික සහ වකුගඩු අකර්මන්‍යතා වැනි දරුණු සෞඛ්‍ය ප්‍රතිවිපාක ඇති කරයි [
6]. එබැවින්, ඔස්ටියෝ ආතරයිටිස් ප්‍රතිකාර සඳහා අඩු අතුරු ආබාධ සහිත වඩාත් ඵලදායී ඖෂධයක් සංවර්ධනය කළ යුතුය.
ස්වාභාවික සෞඛ්‍ය නිෂ්පාදන ආරක්ෂිත සහ පහසුවෙන් ලබා ගත හැකි වීම නිසා ඒවා ජනප්‍රිය වෙමින් පවතී [
7]. සාම්ප්‍රදායික කොරියානු ඖෂධ ආතරයිටිස් ඇතුළු ගිනි අවුලුවන රෝග කිහිපයකට එරෙහිව ඵලදායී බව ඔප්පු කර ඇත [
8]. ඕක්ලන්ඩ්යා ලප්පා ඩීසී. වේදනාව සමනය කිරීම සහ ආමාශය සන්සුන් කිරීම සඳහා චී සංසරණය වැඩි දියුණු කිරීම වැනි ඖෂධීය ගුණාංග සඳහා ප්‍රසිද්ධය, සහ සාම්ප්‍රදායිකව ස්වාභාවික වේදනා නාශකයක් ලෙස භාවිතා කර ඇත [
9]. පෙර වාර්තාවලින් පෙනී යන්නේ A. lappa හි ප්‍රති-ගිනි අවුලුවන හැකියාවක් ඇති බවයි [
10,
11], වේදනා නාශක [
12], පිළිකා නාශක [
13], සහ ආමාශ ආරක්ෂණ [
14] බලපෑම්. A. lappa හි විවිධ ජීව විද්‍යාත්මක ක්‍රියාකාරකම් එහි ප්‍රධාන ක්‍රියාකාරී සංයෝග නිසා ඇතිවේ: costunolide, dehydrocostus lactone, dihydrocostunolide, costuslactone, α-costol, saussurea lactone සහ costuslactone [
15]. පෙර අධ්‍යයනවලින් කියැවෙන්නේ කොස්ටුනිලයිඩ් ලිපොපොලිසැකරයිඩ (LPS) වල ප්‍රති-ගිනි අවුලුවන ගුණාංග පෙන්නුම් කළ බවත්, එය NF-kB නියාමනය සහ තාප කම්පන ප්‍රෝටීන් මාර්ගය හරහා මැක්‍රෝෆේජ් ප්‍රේරණය කළ බවත්ය [
16,
17]. කෙසේ වෙතත්, OA ප්‍රතිකාර සඳහා A. lappa හි විභව ක්‍රියාකාරකම් පිළිබඳව කිසිදු අධ්‍යයනයක් විමර්ශනය කර නොමැත. වර්තමාන පර්යේෂණය (මොනොසෝඩියම්-අයඩොඇසිටේට්) MIA සහ ඇසිටික් අම්ල-ප්‍රේරිත මීයන් ආකෘති භාවිතා කරමින් OA වලට එරෙහිව A. lappa හි චිකිත්සක බලපෑම් විමර්ශනය කර ඇත.
සතුන් තුළ OA හි වේදනා හැසිරීම් සහ ව්‍යාධි භෞතික විද්‍යාත්මක ලක්ෂණ බොහොමයක් නිපදවීමට මොනොසෝඩියම්-අයඩොඇසිටේට් (MIA) ප්‍රසිද්ධ ලෙස භාවිතා කරයි [
18,
19,
20]. දණහිසේ සන්ධිවලට එන්නත් කළ විට, MIA කොන්ඩ්‍රොසයිට් පරිවෘත්තීය ක්‍රියාවලිය අවුල් කරන අතර OA හි ප්‍රධාන රෝග ලක්ෂණ වන කාටිලේජ සහ උපකොන්ඩ්‍රල් අස්ථි ඛාදනය වැනි දැවිල්ල සහ ගිනි අවුලුවන රෝග ලක්ෂණ ඇති කරයි [
18]. ඇසිටික් අම්ලය සමඟ ප්‍රේරණය වන ලිවීමේ ප්‍රතිචාරය සතුන් තුළ පර්යන්ත වේදනාව අනුකරණය කිරීමක් ලෙස පුළුල් ලෙස සැලකේ, එහිදී ගිනි අවුලුවන වේදනාව ප්‍රමාණාත්මකව මැනිය හැකිය [
19]. මූසික මැක්‍රෝෆේජ් සෛල රේඛාව, RAW264.7, දැවිල්ලට සෛලීය ප්‍රතිචාර අධ්‍යයනය කිරීම සඳහා ජනප්‍රියව භාවිතා වේ. LPS සමඟ සක්‍රිය කිරීමෙන් පසු, RAW264 මැක්‍රෝෆේජ් ගිනි අවුලුවන මාර්ග සක්‍රිය කරන අතර TNF-α, COX-2, IL-1β, iNOS, සහ IL-6 වැනි ගිනි අවුලුවන අතරමැදි කිහිපයක් ස්‍රාවය කරයි [
20]. මෙම අධ්‍යයනය මගින් MIA සත්ව ආකෘතිය, ඇසිටික් අම්ලය-ප්‍රේරිත සත්ව ආකෘතිය සහ LPS-සක්‍රීය RAW264.7 සෛල තුළ OA වලට එරෙහිව A. lappa හි ප්‍රති-නොසිසෙප්ටිව් සහ ප්‍රති-ගිනි අවුලුවන බලපෑම් ඇගයීමට ලක් කර ඇත.
2. ද්‍රව්‍ය සහ ක්‍රම
2.1. ශාක ද්‍රව්‍ය
අත්හදා බැලීම සඳහා භාවිතා කරන ලද A. lappa DC. හි වියළි මූල, කොරියාවේ සෝල් හි එපුලිප් ෆාමසියුටිකල් සමාගමෙන් ලබා ගන්නා ලදී. එය ගචොන් විශ්ව විද්‍යාලයේ කොරියානු වෛද්‍ය විද්‍යාව පිළිබඳ කර්නල් හි ශාකසාර ඖෂධ විද්‍යා දෙපාර්තමේන්තුවේ මහාචාර්ය ඩොන්ගුන් ලී විසින් හඳුනාගෙන ඇති අතර වවුචර් නිදර්ශක අංකය 18060301 ලෙස තැන්පත් කර ඇත.
2.2. A. lappa සාරය පිළිබඳ HPLC විශ්ලේෂණය
A. lappa නිස්සාරණය කරන ලද්දේ reflux උපකරණයක් (ආසවනය කළ ජලය, 100 °C දී පැය 3) භාවිතා කරමිනි. නිස්සාරණය කරන ලද ද්‍රාවණය අඩු පීඩන වාෂ්පකාරකයක් භාවිතයෙන් පෙරීම සහ ඝනීභවනය කරන ලදී. A. lappa සාරය −80 °C යටතේ කැටි වියළීමෙන් පසු 44.69% ක අස්වැන්නක් ලබා ගත්තේය. A. lappa හි වර්ණදේහ විශ්ලේෂණය 1260 InfinityⅡ HPLC-පද්ධතියක් (Agilent, Pal Alto, CA, USA) භාවිතා කර සම්බන්ධ කරන ලද HPLC සමඟ සිදු කරන ලදී. වර්ණදේහ වෙන් කිරීම සඳහා, EclipseXDB C18 තීරුව (4.6 × 250 mm, 5 µm, Agilent) 35 °C දී භාවිතා කරන ලදී. නියැදියෙන් මුළු 100 mg 50% මෙතනෝල් මිලි ලීටර් 10 ක තනුක කර විනාඩි 10 ක් සඳහා sonicated කරන ලදී. සාම්පල 0.45 μm හි සිරින්ජ පෙරහනකින් (වෝටර්ස් කෝප්, මිල්ෆර්ඩ්, MA, ඇමරිකා එක්සත් ජනපදය) පෙරහන් කරන ලදී. ජංගම අවධි සංයුතිය 0.1% පොස්පරික් අම්ලය (A) සහ ඇසිටොනයිට්‍රයිල් (B) වූ අතර තීරුව පහත පරිදි ඉවත් කරන ලදී: 0–60 min, 0%; 60–65 min, 100%; 65–67 min, 100%; 67–72 min, 0% ද්‍රාවක B 1.0 mL/min ප්‍රවාහ අනුපාතයකින්. 10 μL එන්නත් පරිමාවක් භාවිතා කරමින් 210 nm හි අපජලය නිරීක්ෂණය කරන ලදී. විශ්ලේෂණය ත්‍රිත්ව ආකාරයෙන් සිදු කරන ලදී.
2.3. සත්ව නිවාස සහ කළමනාකරණය
සති 5ක් වයසැති පිරිමි ස්ප්‍රැග්-ඩෝලි (SD) මීයන් සහ සති 6ක් වයසැති පිරිමි ICR මීයන් Samtako Bio Korea (Gyeonggi-do, Korea) වෙතින් මිලදී ගන්නා ලදී. නියත උෂ්ණත්වය (22 ± 2 °C) සහ ආර්ද්‍රතාවය (55 ± 10%) සහ පැය 12/12 ක සැහැල්ලු/අඳුරු චක්‍රයක් භාවිතා කරමින් සතුන් කාමරයක තබා ගන්නා ලදී. අත්හදා බැලීම ආරම්භ වීමට පෙර සතියකට වැඩි කාලයක් සතුන්ට මෙම තත්ත්වය පිළිබඳව හුරුපුරුදු විය. සතුන්ට ආහාර සහ ජලය සඳහා නොමිලේ සැපයුමක් තිබුණි. Gachon විශ්ව විද්‍යාලයේ (GIACUC-R2019003) සත්ව රැකවරණය සහ හැසිරවීම සඳහා වත්මන් සදාචාරාත්මක නීති සියලුම සත්ව අත්හදා බැලීමේ ක්‍රියා පටිපාටිවලදී දැඩි ලෙස අනුගමනය කරන ලදී. අධ්‍යයනය සැලසුම් කර ඇත්තේ පරීක්ෂක-අන්ධ සහ සමාන්තර අත්හදා බැලීමක් ලෙසය. සත්ව පර්යේෂණාත්මක ආචාර ධර්ම කමිටුවේ මාර්ගෝපදේශ අනුව අපි euthanasia ක්‍රමය අනුගමනය කළෙමු.
2.4. MIA එන්නත් කිරීම සහ ප්‍රතිකාර කිරීම
මීයන් අහඹු ලෙස කාණ්ඩ 4 කට වෙන් කරන ලදී, එනම් ව්‍යාජ, පාලනය, ඉන්ඩොමෙතැසින් සහ ඒ. ලැප්පා. 2% අයිසොෆ්ලෝරේන් O2 මිශ්‍රණයකින් නිර්වින්දනය කරන ලද මීයන්ට, අත්හදා බැලීමේ OA ඇති කිරීම සඳහා දණහිසේ සන්ධිවලට අභ්‍යන්තර-ආර්ටිකල් ලෙස MIA 50 μL (40 mg/m; සිග්මා-ඇල්ඩ්රිච්, ශාන්ත ලුවී, MO, ඇමරිකා එක්සත් ජනපදය) එන්නත් කරන ලදී. ප්‍රතිකාර පහත පරිදි සිදු කරන ලදී: පාලනය සහ ව්‍යාජ කණ්ඩායම් නඩත්තු කරන ලද්දේ AIN-93G මූලික ආහාර වේල සමඟ පමණි. ඉන්ඩොමෙතැසින් කාණ්ඩයට AIN-93G ආහාර වේලට ඇතුළත් කරන ලද ඉන්ඩොමෙතැසින් (3 mg/kg) සහ A. ලැප්පා 300 mg/kg කාණ්ඩයට A. ලැප්පා (300 mg/kg) සමඟ අතිරේක AIN-93G ආහාර වේලට පවරන ලදී. OA ප්‍රේරණය කළ දින සිට දින 24 ක් දිනපතා ශරීර බර 190–210 g ට 15–17 g අනුපාතයකින් ප්‍රතිකාර දිගටම කරගෙන යන ලදී.
2.5 බර දරාගැනීමේ මිනුම්
OA ප්‍රේරණයෙන් පසුව, මීයන්ගේ පසුපස පාදවල බර දරාගැනීමේ ධාරිතාව මැනීම, නියමිත පරිදි incapacity-MeterTester600 (IITC Life Science, Woodland Hills, CA, USA) සමඟ සිදු කරන ලදී. පසුපස පාදවල බර බෙදා හැරීම ගණනය කරන ලදී: බර දරාගැනීමේ ධාරිතාව (%)
