ඔස්ටියෝ ආතරයිටිස් (OA) යනු 65 ට වැඩි වයස්ගත ජනගහනයට බලපාන දිගුකාලීන නිදන්ගත පරිහානීය අස්ථි සන්ධි රෝග වලින් එකකි.
1]. සාමාන්‍යයෙන්, OA රෝගීන්ට හානියට පත් කාටිලේජ, ආසාධනය වූ සයිනෝවියම් සහ ඛාදනය වූ කොන්ඩ්‍රොසයිට්, වේදනාව සහ ශාරීරික අපහසුතාවයන් ඇති කරයි.
2]. ආතරයිටීස් වේදනාව ප්‍රධාන වශයෙන් ඇතිවන්නේ දැවිල්ලෙන් සන්ධිවල ඇති කාටිලේජ ක්‍ෂය වීම නිසා වන අතර, කාටිලේජයට බරපතළ ලෙස හානි වූ විට අස්ථි එකිනෙක ගැටීමෙන් දරාගත නොහැකි වේදනාවක් සහ ශාරීරික අපහසුතා ඇති විය හැක.
3]. වේදනාව, ඉදිමීම සහ සන්ධියේ තද ගතිය වැනි රෝග ලක්ෂණ සහිත ගිනි අවුලුවන මැදිහත්කරුවන්ගේ සම්බන්ධය හොඳින් ලේඛනගත කර ඇත. OA රෝගීන් තුළ, කාටිලේජ සහ උපකොන්ඩ්‍රල් අස්ථි ඛාදනය වීමට හේතු වන ගිනි අවුලුවන සයිටොකයින් සයිනෝවියල් තරලයේ දක්නට ලැබේ.
4]. OA රෝගීන්ට සාමාන්‍යයෙන් ඇති ප්‍රධාන පැමිණිලි දෙකක් වන්නේ වේදනාව සහ සයිනෝවියල් දැවිල්ලයි. එබැවින් වත්මන් OA ප්‍රතිකාරවල මූලික අරමුණු වන්නේ වේදනාව සහ දැවිල්ල අඩු කිරීමයි. [
5]. ස්ටෙරොයිඩ් නොවන සහ ස්ටෙරොයිඩ් ඖෂධ ඇතුළුව පවතින OA ප්‍රතිකාර වේදනාව සහ දැවිල්ල සමනය කිරීමේ කාර්යක්ෂමතාව ඔප්පු කර ඇතත්, මෙම ඖෂධවල දිගුකාලීන භාවිතය හෘද වාහිනී, ආමාශ ආන්ත්රයික සහ වකුගඩු අකර්මන්ය වීම වැනි බරපතල සෞඛ්ය ප්රතිවිපාක ඇති කරයි.
6]. මේ අනුව, ඔස්ටියෝ ආතරයිටිස් සඳහා ප්‍රතිකාර කිරීම සඳහා අඩු අතුරු ආබාධ සහිත වඩාත් ඵලදායී ඖෂධයක් නිපදවිය යුතුය.
ආරක්ෂිත සහ පහසුවෙන් ලබා ගත හැකි වීම සඳහා ස්වභාවික සෞඛ්ය නිෂ්පාදන වැඩි වැඩියෙන් ජනප්‍රිය වෙමින් පවතී [
7]. සාම්ප්‍රදායික කොරියානු ඖෂධ ආතරයිටිස් ඇතුළු ගිනි අවුලුවන රෝග කිහිපයකට එරෙහිව කාර්යක්ෂමතාව ඔප්පු කර ඇත.
8]. ඕක්ලන්ඩියා ලප්පා ඩීසී. වේදනාව සමනය කිරීම සහ ආමාශය සමනය කිරීම සඳහා qi සංසරණය වැඩි දියුණු කිරීම වැනි ඖෂධීය ගුණ සඳහා ප්‍රසිද්ධ වන අතර එය සාම්ප්‍රදායිකව ස්වාභාවික වේදනා නාශකයක් ලෙස භාවිතා කර ඇත.
9]. A. ලැප්පා සතුව ප්‍රති-ගිනි අවුලුවන [Anti-Inflammation] ඇති බව පෙර වාර්තා පෙන්වා දෙයි.
10,
11], වේදනා නාශක [
12], පිළිකා නාශක [
13], සහ gastroprotective [
14] බලපෑම්. A. Lappa හි විවිධ ජීව විද්‍යාත්මක ක්‍රියාකාරකම් එහි ප්‍රධාන ක්‍රියාකාරී සංයෝග නිසා ඇතිවේ: කොස්ටුනොලයිඩ්, ඩිහයිඩ්‍රොකොස්ටස් ලැක්ටෝන්, ඩයිහයිඩ්‍රොකොස්ටූනොලයිඩ්, කොස්ටස්ලැක්ටෝන්, α-කොස්ටෝල්, සෝසුරියා ලැක්ටෝන් සහ කොස්ටස්ලැක්ටෝන් [
15]. පෙර අධ්‍යයනයන් කියා සිටින්නේ කොස්ටුනොලයිඩ් ලිපොපොලිසැකරයිඩ (LPS) හි ප්‍රති-ගිනි අවුලුවන ගුණාංග පෙන්නුම් කරන බවයි, එය NF-kB නියාමනය කිරීම සහ තාප කම්පන ප්‍රෝටීන් මාර්ගය හරහා මැක්‍රෝෆේජ් ප්‍රේරණය කරන ලදී.
16,
17]. කෙසේ වෙතත්, OA ප්‍රතිකාර සඳහා A. lappa හි විභව ක්‍රියාකාරකම් පිළිබඳව කිසිදු අධ්‍යයනයක් විමර්ශනය කර නොමැත. වර්තමාන පර්යේෂණය (මොනොසෝඩියම්-අයෝඩෝඇසිටේට්) MIA සහ ඇසිටික් අම්ලය-ප්‍රේරිත මීයන් ආකෘති භාවිතා කරමින් OA වලට එරෙහිව A. ලැප්පා හි චිකිත්සක බලපෑම් විමර්ශනය කර ඇත.
Monosodium-iodoacetate (MIA) බොහෝ වේදනා චර්යාවන් සහ සතුන් තුළ OA හි ව්‍යාධි භෞතික විද්‍යාත්මක ලක්ෂණ නිපදවීමට ප්‍රසිද්ධව භාවිතා කරයි.
18,
19,
20]. දණහිසේ සන්ධිවලට එන්නත් කළ විට, MIA chondrocyte පරිවෘත්තීය අවුල් කරන අතර OA හි ප්‍රධාන රෝග ලක්ෂණ වන කාටිලේජ සහ subchondral අස්ථි ඛාදනය වැනි දැවිල්ල සහ ගිනි අවුලුවන රෝග ලක්ෂණ ඇති කරයි.
18]. ඇසිටික් අම්ලය සමඟ ඇතිවන දඟලන ප්‍රතිචාරය, ගිනි අවුලුවන වේදනාව ප්‍රමාණාත්මකව මැනිය හැකි සතුන්ගේ පර්යන්ත වේදනාවේ අනුකරණයක් ලෙස පුළුල් ලෙස සැලකේ.
19]. මූසික මැක්‍රෝෆේජ් සෛල රේඛාව, RAW264.7, ප්‍රදාහයට සෛලීය ප්‍රතිචාර අධ්‍යයනය කිරීම සඳහා ජනප්‍රියව භාවිතා වේ. LPS සමඟ සක්‍රිය කිරීමෙන් පසු, RAW264 මැක්‍රෝෆේජ් මගින් ගිනි අවුලුවන මාර්ග සක්‍රිය කරන අතර TNF-α, COX-2, IL-1β, iNOS, සහ IL-6 වැනි ගිනි අවුලුවන අතරමැදියන් කිහිපයක් ස්‍රාවය කරයි.
20]. මෙම අධ්‍යයනය මගින් MIA සත්ව ආකෘතිය, ඇසිටික් අම්ලය මගින් ප්‍රේරිත සත්ව ආකෘතිය සහ LPS-සක්‍රිය RAW264.7 සෛල තුළ OA වලට එරෙහිව A. lappa හි ප්‍රති-නොසිසෙප්ටිව් සහ ප්‍රති-ගිනි අවුලුවන බලපෑම් ඇගයීමට ලක් කර ඇත.
2. ද්රව්ය සහ ක්රම
2.1 ශාක ද්රව්ය
A. lappa DC හි වියළි මූල. අත්හදා බැලීමේ දී භාවිතා කරන ලද්දේ Epulip Pharmaceutical Co., Ltd., (Seoul, Korea) වෙතින් ලබා ගන්නා ලදී. එය Gachon විශ්වවිද්‍යාලයේ කොරියන් වෛද්‍ය විද්‍යාව පිළිබඳ කර්නල්, ශාකසාර ඖෂධවේදය පිළිබඳ දෙපාර්තමේන්තුවේ මහාචාර්ය Donghun Lee විසින් හඳුනාගෙන ඇති අතර, වවුචර් ආදර්ශ අංකය 18060301 ලෙස තැන්පත් කර ඇත.
2.2 A. lappa සාරය HPLC විශ්ලේෂණය
A. ලප්පා නිස්සාරණය කර ඇත්තේ ප්‍රත්‍යාවර්තක උපකරණයක් (ආසවනය කළ ජලය, 100 ° C දී පැය 3) භාවිතා කරමිනි. නිස්සාරණය කරන ලද ද්‍රාවණය අඩු පීඩන වාෂ්පකාරකයක් භාවිතයෙන් පෙරීම සහ ඝනීභවනය කරන ලදී. A. ලැප්පා සාරය −80 °C යටතේ ශීත කළ වියළීමකින් පසු 44.69% ක අස්වැන්නක් ලබා ඇත. 1260 InfinityⅡ HPLC-පද්ධතියක් (Agilent, Pal Alto, CA, USA) භාවිතයෙන් සම්බන්ධිත HPLC සමඟ A. lappa හි වර්ණදේහ විශ්ලේෂණය සිදු කරන ලදී. වර්ණ වෙන් කිරීම සඳහා, EclipseXDB C18 තීරුව (4.6 × 250 mm, 5 µm, Agilent) 35 °C දී භාවිතා කරන ලදී. නියැදියේ මුළු මිලිග්‍රෑම් 100 ක් 50% මෙතනෝල් මිලි ලීටර් 10 ක තනුක කර විනාඩි 10 ක් සොනිකේට් කර ඇත. සාම්පල 0.45 μm හි සිරින්ජ පෙරහනකින් (Waters Corp., Milford, MA, USA) පෙරීම සිදු කරන ලදී. ජංගම අදියර සංයුතිය 0.1% පොස්පරික් අම්ලය (A) සහ ඇසිටොනිට්‍රයිල් (B) සහ තීරුව පහත පරිදි ඉවත් කර ඇත: 0-60 විනාඩි, 0%; මිනිත්තු 60-65, 100%; මිනිත්තු 65-67, 100%; 67-72 min, 0% ද්රාවණ B 1.0 mL / min ප්රවාහ අනුපාතය සමඟ. 10 μL එන්නත් පරිමාවක් භාවිතා කරමින් අපජලය 210 nm දී නිරීක්ෂණය කරන ලදී. විශ්ලේෂණය තුන් ගුණයකින් සිදු කරන ලදී.
2.3 සත්ව නිවාස හා කළමනාකරණය
සති 5 ක් වයසැති පිරිමි Sprague-Dawley (SD) මීයන් සහ සති 6 ක් වයසැති පිරිමි ICR මීයන් Samtako Bio Korea (Gyeonggi-do, Korea) වෙතින් මිලදී ගන්නා ලදී. නියත උෂ්ණත්වය (22 ± 2 °C) සහ ආර්ද්‍රතාවය (55 ± 10%) සහ පැය 12/12 ක ආලෝකය/අඳුරු චක්‍රයක් භාවිතා කරමින් කාමරයක සතුන් තබා ඇත. අත්හදා බැලීම ආරම්භ කිරීමට සතියකට වඩා වැඩි කාලයක් සතුන් මෙම තත්ත්වය පිළිබඳව හුරුපුරුදු විය. සතුන්ට අවශ්‍ය පරිදි ආහාර සහ ජලය සැපයීමක් තිබුණි. Gachon විශ්ව විද්‍යාලයේ (GIACUC-R2019003) සත්ව රැකවරණය සහ හැසිරවීම සඳහා දැනට පවතින සදාචාරාත්මක නීති සියලුම සත්ව පරීක්ෂණ ක්‍රියා පටිපාටිවලදී දැඩි ලෙස අනුගමනය කරන ලදී. අධ්‍යයනය සැලසුම් කර ඇත්තේ විමර්ශක-අන්ධ සහ සමාන්තර නඩු විභාගයයි. සත්ව පර්යේෂණාත්මක ආචාර ධර්ම කමිටුවේ මාර්ගෝපදේශ අනුව අපි euthanasia ක්‍රමය අනුගමනය කළෙමු.
2.4 MIA එන්නත් කිරීම සහ ප්‍රතිකාර
මීයන් අහඹු ලෙස කාණ්ඩ 4 කට බෙදා ඇත, එනම් ෂාම්, පාලනය, ඉන්ඩොමෙතසින් සහ ඒ. 2% isofluorane O2 මිශ්‍රණයෙන් නිර්වින්දනය කර, මීයන් 50 μL MIA (40 mg/m; Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA) භාවිතා කරමින් දණහිසේ සන්ධිවලට අභ්‍යන්තරව පර්යේෂණාත්මක OA වලට යොමු කරන ලදී. ප්‍රතිකාර පහත පරිදි සිදු කරන ලදී: පාලනය සහ ව්‍යාජ කණ්ඩායම් පවත්වා ගෙන යනු ලැබුවේ AIN-93G මූලික ආහාර වේලක් සමඟ පමණි. indomethacin කාණ්ඩයට AIN-93G ආහාර වේලට ඇතුළත් කර ඇති indomethacin (3 mg/kg) පමණක් ලබා දී ඇති අතර A. Lappa (300 mg/kg) සමඟ අතිරේකව AIN-93G ආහාර වේලට A. Lappa 300 mg/kg කාණ්ඩයක් ලබා දී ඇත. දෛනික පදනම මත 190-210 ග්රෑම් ශරීර බරකට 15-17 ග්රෑම් අනුපාතයකින් OA ප්‍රේරණය වූ දින සිට දින 24 ක් ප්‍රතිකාර අඛණ්ඩව සිදු කරන ලදී.
2.5 බර උසුලන මිනුම්
OA ප්‍රේරණයෙන් පසුව, නියමිත පරිදි අබලතා-MeterTester600 (IITC Life Science, Woodland Hills, CA, USA) සමඟ මීයන්ගේ පසුපස පාදවල බර උසුලන ධාරිතාව මැනීම සිදු කරන ලදී. පසුපස පාදවල බර බෙදා හැරීම ගණනය කරන ලදී: බර ඉසිලීමේ ධාරිතාව (%)
